樣品處理

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g 離心 5min，取全部上清于 4℃、100000g離心30min，棄上清，取沉淀溶于 1mL 試劑一。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后于4℃，10000g 離心5min，取全部上清于4℃、100000g 離心30min，棄上清，取沉淀溶于1mL試劑一。

3. 血清：直接測(cè)定。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

試劑組成和配制

提取液：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑一：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體 50mL×1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體×5 瓶，-20℃避光保存。臨用前根據(jù)用量每瓶加入4.5mL試劑二充分混勻。(3天使用完)

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：操作時(shí)間短，48-50T，可測(cè)40例樣本左右，96-100T,可測(cè)80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè)，部分試劑盒取樣多少請(qǐng)；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線(xiàn)性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。

測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

志賀氏菌增菌肉湯-新生 英文名稱(chēng)：Shigella Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g

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半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂 英文名稱(chēng)：Semisolid Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

麥康凱瓊脂(MAC) 英文名稱(chēng)：MaConkey Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

酚紅煌綠瓊脂 英文名稱(chēng)：Phenol Red Brilliant Green Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g

乳糖肉湯培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Lactose Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：500g

脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Deoxycholate Citrate Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g

志賀氏菌（BCT）增菌液 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：250g

半固體瓊脂管 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：6ml*10支

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