人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
 
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人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基說明書根瘤菌酒假絲酵母 Candida kefyr

羊IgG蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

糖細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia corallina

NCI-H295R(人腎上腺皮質(zhì)腺細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.

小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基293E(人胚腎細(xì)胞（EBNA1基因修飾）)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿菌 Lactobacillus plantarum

小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

香菇 Lentinula edodes葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

人牙周膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基小鼠艾氏腹水細(xì)胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala傘枝犁霉 Absidia corymbifera
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