SNU-5(人胃癌細(xì)胞)價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
亞硫酸鐵瓊脂/Sulfite Iron Agar用于厭氧亞硫酸鹽還原桿菌的平板計(jì)數(shù)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

HHCC(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人十二指腸腺細(xì)胞英文名稱：HuTu-80

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽糖蔗糖瓊脂/DCLS瓊脂/DCLS Agar致病性腸桿菌的分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Mammalian Protein Extraction Reagent/哺動(dòng)物蛋白抽提試劑25次、100次國產(chǎn)

蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒規(guī)格：>200次

亮綠瓊脂培養(yǎng)基/Brilliant Green Agar沙門氏菌分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H716(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

小鼠結(jié)腸細(xì)胞英文名稱：CT-26 WT

副溶血性弧菌增菌液副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

RLFs, 大鼠肺成纖維細(xì)胞

雜交瘤細(xì)胞抗 AChE英文名稱：AE-2

雙歧桿菌BS培養(yǎng)基/BS Medium用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SNU-5(人胃癌細(xì)胞)價(jià)格0.78-50 ng/mL人亞甲基四氫葉酸還原酶（Methylenetetrahydrofolate reductase）ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Human Methylenetetrahydrofolate reductase

78-5000 pg/mL人金屬-β-內(nèi)酰胺酶結(jié)構(gòu)域蛋白1 (MBLAC1) ELISA試劑盒

78-5000 pg/mLELISA Kit for Human Metallo-beta-lactamase domain-containing protein 1

0.156-10 ng/mL人β微精原蛋白（Beta-microseminoprotein/PRSP）ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mLELISA Kit for Human Beta-microseminoprotein

0.312-20 ng/mL人胃饑餓素 O-酰基轉(zhuǎn)移酶(GOAT)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Ghrelin O-acyltransferase
SNU-5(人胃癌細(xì)胞)價(jià)格細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)價(jià)格功能：
（1）       血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）       表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）       與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（1）       主動(dòng)脈硬化。
（2）       主動(dòng)脈瘤
（3）       主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（1）       組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）       鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）       原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）       每凍存管細(xì)胞數(shù)：>5×105 cells/1ml。
（5）       肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。


小鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis

臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

小單孢菌 Micromonospora sp.大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

葡枝根霉 Rhizopus stoloniferCaco-2，人結(jié)直腸腺細(xì)胞

黃綠綠僵菌 Metarhizium flavoviride黑木耳 Auricularia auricula

洋蔥假單胞菌 Pseudomonas cepacia釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

褐色小單孢菌 Micromonospora fusca毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基純白鏈霉菌 Streptomyces candidus

彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)AM(人腺樣囊性細(xì)胞（高轉(zhuǎn)移）)

磚紅鐮孢 Fusarium lateritium人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisC6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)價(jià)格0.78-50 ng/mL人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

0.78-50 ng/mLELISA Kit for Human Lactotransferrin

6.25-400 ng/mL人肝脂酶(LIPC)ELISA試劑盒

6.25-400 ng/mLELISA Kit for Human Hepatic triacylglycerol lipase

0.312-20 ng/mL人溶血磷脂酸受體4(LPAR4)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Lysophosphatidic acid receptor 4

7.8-500 pg/mL人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒

7.8-500 pg/mLELISA Kit for Human Leukemia inhibitory factor receptor
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)價(jià)格運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線