基因探針法PCR試劑盒的使用細(xì)節(jié)分享
點擊次數(shù):836 更新時間:2021-12-15
基因探針法PCR試劑盒操作中,須特別注意細(xì)節(jié)問題,細(xì)節(jié)往往決定著試驗的成功與否。關(guān)于本產(chǎn)品實驗操作,這些細(xì)節(jié)很重要:
1、合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
2、吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。
3、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4、吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn)確。
5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液。
7、每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
8、要盡量做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。
9、手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
10、為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
11、樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。
12、實驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。
13、剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
14、沒有去離子水或雙蒸水時,可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來水。
15、對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。